核因子κB（NF-κB）信号通路在免疫反应、炎症、细胞存活和癌症等多种过程中扮演着关键角色。经典通路在固有免疫反应，细胞存活中发挥重要作用。非经典NF-κB信号通路的异常激活与多种癌症和自身免疫性疾病密切相关，如弥漫大B细胞淋巴瘤、结直肠癌等。尽管已有一些针对非经典 NF-κB 信号通路的抑制剂（如硼替佐米、卡非佐米等）取得进展，但这些药物在抑制非经典NF-κB信号通路时，也会影响经典NF-κB信号通路，导致副作用。因此，开发特异性抑制非经典NF-κB信号通路的抑制剂成为当务之急。

近日，广医-广州生物院联合生科院张笑人团队在Molecular Therapy期刊在线发表了题为Development of RelB-Targeting Small Molecule Inhibitors of Non-canonical NF-κB Signaling with Antitumor Efficacy的研究论文，成功开发了特异性抑制非经典NF-κB信号通路的小分子抑制剂 RS47。该抑制剂通过靶向 RelB 蛋白，抑制其与靶DNA结合，从而抑制非经典NF-κB信号通路，且不影响经典NF-κB信号通路。这一突破为结直肠癌和弥漫大B细胞淋巴瘤的治疗提供了新的方向。

研究团队通过基于RelB蛋白结构的高通量虚拟筛选和基于报告基因的细胞筛选系统，从 20 多万种化合物中层层筛选，最终发现了 RS09 和 RS47 这两种潜在的靶向RelB的非经典NF-κB通路抑制剂。研究人员根据化合物靶向 RelB 的能力，通过Bcl-3和 c-Myc 荧光素酶报告基因实验，结合化合物对结肠癌细胞系 HCT116 细胞活力的影响，综合各项实验指标，确定了 RS09 和 RS47 作为候选小分子。

机制研究表明，RS47 能与 RelB 蛋白直接结合，阻断 RelB 与靶 DNA 的结合，从而抑制非经典 NF-κB 信号通路。研究团队通过荧光素酶报告基因实验、pull-down 实验、EMSA实验，微量热涌动实验（MST），免疫荧光实验，RNA高通量测序等多种实验方法验证了这一机制。同时，实验证明 RS47 对经典 NF-κB 信号通路没有抑制作用，进一步证实了其靶向特异性，大大减少了潜在的副作用。在功能方面，RS47在结直肠癌和 B 淋巴瘤细胞中展现出强大的抗癌能力。体外实验表明，RS47能促进结直肠癌细胞系和 B 淋巴瘤细胞系细胞凋亡。在体内成瘤实验中，给接种了 B 淋巴瘤肿瘤组织（PDX）的裸鼠腹腔注射 RS47后，肿瘤体积和重量明显减小，且对小鼠体重没有明显影响，表明 RS47 在抑制肿瘤的同时，毒副作用小。

综上所述，实验团队成功开发了RS47作为非经典NF-κB信号通路的抑制剂，能够结合RelB并抑制其与靶DNA结合。基于RS47对结直肠癌和B淋巴瘤生长的显著抑制作用，未来有望将其优化为治疗由非典型NF-κB 信号通路的激活引起的癌症的有效药物。

广医-广州生物院联合生科院张笑人教授为本文通讯作者，中国科学院上海药物研究所朱维良教授和广州医科大学蒋宇航博士为共同通讯作者。原广州医科大学助理研究员、现清华大学博士后李翠峰博士为本文第一作者，广州医科大学魏淑琪硕士、已毕业孙东麟博士、中国科学院上海药物研究所杨卓博士、原广州医科大学博士后王琪博士为本文共同第一作者，本研究获得了国家重点研发计划（2018YFA0107500、2016YFC1302400）、国家自然科学基金（32370894、91949102、91742113、31570902、81771752 和 31370881）以及广州市重点医学学科建设项目基金的资助。本项工作得到了时玉舫教授、刘永忠教授和刘三宏教授等老师的指导和大力支持。